預(yù)約儀器:提前幾天預(yù)約BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30儀器,以確保實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行,預(yù)約成功后,采取下一步操作。
準(zhǔn)備:確認(rèn)需要清洗的離心桶、離心桶蓋完好無(wú)損
清洗:BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30轉(zhuǎn)頭型號(hào)JLA-16-250對(duì)應(yīng)的規(guī)格為250ml的低速離心桶,準(zhǔn)備4個(gè)。離心桶及桶蓋使用去去污劑刷洗干凈以去除雜蛋白,后使用去離子水沖洗干凈。吸取水檢測(cè)蛋白濃度,是否符合要求,以及檢測(cè)其中的去污劑是否去除干凈,可省略)。
高壓:將離心桶用牛皮紙包好,貼上高壓鍋滅菌(還未查看是否能支持高壓滅菌)
注意:防止離心桶緊貼高壓鍋,防止損壞。
化凍:將500ml的118、124放于25℃水浴鍋中化凍。
開(kāi)機(jī):趁化凍期間刷卡接通電源,再打開(kāi)離心機(jī)右側(cè)電源開(kāi)關(guān)。
放轉(zhuǎn)子:確認(rèn)JLA-16-250轉(zhuǎn)子對(duì)準(zhǔn)底座后放入
調(diào)程序:點(diǎn)擊轉(zhuǎn)子對(duì)應(yīng)的JLA-16-250所對(duì)應(yīng)的型號(hào),選擇轉(zhuǎn)速5000rpm,時(shí)間10min,4℃。
注意:不要超過(guò)離心機(jī)所對(duì)應(yīng)的離心轉(zhuǎn)速范圍。
預(yù)冷:蓋上離心機(jī)蓋子,然后用雙手按下離心機(jī)門(mén),進(jìn)行預(yù)冷。
配平:將要離心的樣品用天平配平,誤差不大于0.1g,配平過(guò)程中要包括離心桶的蓋子,密封圈,裝液量要超過(guò)離心桶的80%以上。
開(kāi)蓋:打開(kāi)離心蓋子時(shí),使用腳踩住開(kāi)門(mén)連鎖裝置,并且雙手輕拂蓋子,防止蓋子被彈開(kāi)。
離心:離心開(kāi)始時(shí),注意蓋好蓋子,包括離心機(jī)的內(nèi)腔蓋子和離心機(jī)主蓋子,再次確認(rèn)所使用的離心機(jī)轉(zhuǎn)子型號(hào)和所選參數(shù),點(diǎn)擊開(kāi)始鍵開(kāi)始離心。
注意:離心速度未達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí),不能離開(kāi)離心機(jī),如果出現(xiàn)警報(bào)或者異響,應(yīng)立即停止,并聯(lián)系管理人員。
關(guān)機(jī):離心結(jié)束后,先關(guān)閉離心機(jī)右側(cè)電源后刷卡下機(jī)。
歸位:使用完的物品清洗干凈后,放回原位,并做好登記。
取上清:準(zhǔn)備一個(gè)干凈的500ml瓶子,將上清倒入500ml瓶中,并標(biāo)記好名稱(chēng)、日期,離心后產(chǎn)物,存貯方式。
收集沉淀,將離心桶中的細(xì)胞沉淀收集到合適的EP管中,標(biāo)記名稱(chēng)、日期、離心后產(chǎn)物。